Настоящий документ устанавливает методику измерений количества выживших в тестируемой воде Daphnia magna Straus методом прямого счета, используемого для определения острой токсичности питьевых вод, вод пресных (поверхностных, грунтовых, сточных, очищенных сточных) и водных вытяжек из грунтов, почв, осадков сточных вод, донных отложений, отходов производства и потребления в лабораторных условиях.
Для проведения измерений по данной методике применяют следующие средства измерений, испытательное и вспомогательное оборудование, материалы и реактивы:
5.1 Средства измерений:
- весы лабораторные общего назначения второго класса точности (ГОСТ Р 53228) с наибольшим пределом взвешивания 200 г;
- весы аналитические любого типа с разрешением до 0,001 г.
- гири (ГОСТ OIML R 111-1);
- рН-метр электронный любого типа, например, рН-420, ТУ 4215-008-81696414 или аналогичный, диапазон измерений от 0 до 14 ед. рН, предел допускаемой основной абсолютной погрешности измерений ±0,05 ед. рН;
- люксметр Ю116 (ГОСТ 8.014) или аналогичный, диапазон измерений от 10 до 10000 лк, предел допустимой погрешности не более ±10% от значения измеряемой освещенности;
- измеритель оптической плотности ИПС-03, ТУ 4437-003-26218570 или ТУ 26.70.23-001-64091810, диапазон измерений оптической плотности 0-0,65, пределы допускаемой абсолютной погрешности ± 0,01;
- измеритель температуры цифровой переносной ИТ5-Т "Термит" ТУ 4211-008-42187449-2003, Госреестр № 27526-04, диапазон измерения от 0 до 100 °С, пределы допускаемой абсолютной погрешности ± 0,5°С;
- цилиндры мерные вместимостью 25, 50, 100, 250 см3 второго класса точности (ГОСТ 1770);
- колбы мерные 25, 50, 100 см3 (ГОСТ 1770);
- пипетки градуированные вместимостью 1, 2, 5, 10 см3 с ценой деления 0,1 см3 второго класса точности (ГОСТ 29227) или автоматические пипетки (дозаторы) вместимостью 1–5 см3
5.2. Испытательное оборудование:
- Климатостат Р-2 (ТУ 4211-004-26218570 или ТУ 26.51.70-004-64091810) или климатостат В3 (ТУ 4211-008-26218570 или ТУ 26.51.70-004-64091810) или климатостат В4 (ТУ 4211-008-26218570 или ТУ 26.51.70-004-64091810), позволяющие поддерживать освещение лампами дневного света или светодиодами (1200–2500) люкс, фотопериод (12+12 часов) и температуру окружающего воздуха (20±1) °С;
- устройство для экспонирования рачков УЭР-03 (ТУ 3615-006-26218570 или ТУ 26.51.66-006-64091810) в комплекте со стеклянными пробирками рабочим объемом 50 см3;
- культиватор КВ-05 для культивирования водорослей (ТУ 3615-006-26218570 или ТУ 26.51.70-005-64091810) или КВ-06 (ТУ 26.51.70-005-64091810);
- сушильный шкаф любого типа, обеспечивающий поддержание температуры в диапазоне от (+40) до (+200) °С, точность поддержания температуры ±5 °С.
5.3. Вспомогательное оборудование:
- центрифуга лабораторная с комплектом пробирок 50–100 см3 , скорость вращения ротора 3000–5000 об/мин;
- аппарат для встряхивания жидкости, например, АВУ-6С (ТУ 64-1-2451);
- холодильник бытовой, обеспечивающий замораживание (до минус 18°С) и хранение проб (от +2°С до +4°С);
- барометр любого типа для измерения атмосферного давления в рабочем помещении, например, Бриг ПБ-11;
- гигрометр любого типа для измерения влажности в рабочем помещении, например, МЕГЕОН 20060;
- пипетки стеклянные объемом 2 см3 (ГОСТ 29227) с отрезанным и оплавленным концом для пересадки рачков или стеклянные трубочки длиной 35-40 см с внутренним диаметром 5-6 мм;
- воронки лабораторные (ГОСТ 25336);
- воронка Бюхнера (ГОСТ 9147);
- стаканы стеклянные лабораторные вместимостью 50, 250, 500, 1000 см3 (ГОСТ 25336);
- склянки и банки стеклянные с винтовым горлом, с прокладкой и крышкой или с притертой пробкой для отбора и хранения проб вместимостью 500, 1000, 2000, 5000 см3 (ГОСТ 34037);
- флаконы и банки цилиндрические полиэтиленовые или политетрафторэтановые с навинчивающимися крышками для отбора и хранения проб и реактивов вместимостью 100, 250, 500, 1000, 2000 см3 (ТУ 6-19-110);
- стаканчики весовые (бюксы) алюминиевые с крышками ВС-1 для сушки проб до абсолютно-сухого состояния;
- эксикатор исполнения 2 по ГОСТ 25336 со вставкой исполнения по ГОСТ 9147;
- колбы стеклянные вместимостью 1000 см3 (ГОСТ 25336);
- сита почвенные (ТУ 46-47-885) с размером ячеек 1 мм;
- шпатели металлические (ГОСТ 19126);
- пробоотборник объемом 500–700 см3 (ГОСТ 6859);
- буры почвенные;
- батометр-бутылка на штанге тип ГР-16М (ТУ 25-04-1749);
- щупы винтообразные с продольным вырезом поршневые (ГОСТ 2517);
- ножи почвенные (ГОСТ 23707);
- лопаты (ГОСТ 19596);
- термосумка любого типа, например, сумка-холодильник СХВ-12 для транспортировки проб в теплый и холодный сезоны года.
5.4. Тест-культура, материалы и реактивы:
- тест-культура Daphnia magna Straus;
- культура зеленой водоросли Chlorella vulgaris Beijer для кормления дафний;
- дрожжи хлебопекарные (ГОСТ Р 54845);
- вода дистиллированная (ГОСТ 6709);
- вода питьевая из водопроводной сети или бутилированная (ГОСТ Р 51232) для содержания дафний;
- калий двухромовокислый ХЧ или ЧДА (ГОСТ 4220);
- калий азотнокислый ХЧ или ЧДА (ГОСТ 4217);
- калий фосфорнокислый однозамещенный ХЧ или ЧДА (ГОСТ 4198);
- магний сернокислый 7-водный ХЧ или ЧДА (ГОСТ 4523);
- железо лимоннокислое Ч (ТУ 6-09-2562);
- кислота борная ХЧ (ГОСТ 9656);
- аммоний ванадиевокислый мета Ч или ЧДА (ГОСТ 9336);
- марганец хлористый 4-водный Ч или ЧДА (ГОСТ 612);
- молибдена окись Ч (ТУ 6-09-4471);
- цинка сульфат 7-водный ХЧ или ЧДА (ГОСТ 4174);
- кислота соляная ХЧ или ЧДА (ГОСТ 3118);
- кислота азотная ХЧ или ЧДА (ГОСТ 4461);
- натрия гидроокись ХЧ или ЧДА (ГОСТ 4328);
- ткани шелковые (для муки и крахмала – мельничный газ) № 25-43 (ГОСТ 4403);
- фильтры бумажные обеззоленные «белая лента» (ТУ 2642-001-13927158, ГОСТ 12026);
- фильтры мембранные с диаметром пор 3,5 мкм «Владипор» марки МФАС-ОС-2 (ТУ 6-55-221-1029), МФАС-П-4 (ТУ 6-55-221-903) или аналогичные зарубежного производства;
- вата хлопковая медицинская гигроскопическая (ГОСТ 5556);
- бинт марлевый медицинский (ГОСТ 1172).
Примечание: допускается использование других средств измерений утвержденного типа, испытательного, вспомогательного оборудования, реактивов и материалов, отличающихся от вышеперечисленных, имеющих аналогичные метрологические и технические характеристики.